In der biologischen Forschung werden normalerweise Polypeptide mit einer langen Sequenz verwendet. Für Peptide mit mehr als 60 Aminosäuren in der Sequenz werden die Genexpression und SDS-PAGE im Allgemeinen verwendet, um sie zu erhalten. Diese Methode dauert jedoch lange und der Endprodukt -Trennungseffekt ist nicht gut.
Herausforderungen und Lösungen für die lange Peptidsynthese
In der Synthese langer Peptide stehen wir immer mit einem Problem konfrontiert, dh dem sterischen Hindernis der Kondensationsreaktion nimmt mit dem Anstieg der Sequenz in der Synthese zu, und die Reaktionszeit muss angepasst werden, um die Reaktion vollständig zu machen. Je länger die Reaktionszeit ist, desto mehr Nebenwirkungen werden erzeugt und es wird ein Teil des Zielpeptids gebildet. Solche Reste - mangelhafte Peptidketten sind Schlüsselverunreinigungen, die in der langen Peptidsynthese produziert werden. Daher müssen wir bei der Synthese eines langen Peptids das Schlüsselproblem überwinden, um die hochwertigen Reaktionsbedingungen und Reaktionsmethoden zu untersuchen, um die Aminosäurekondensationsreaktion umfassender und voller zu gestalten. Reduzieren Sie außerdem die Reaktionszeit, denn je länger die Reaktionszeit, desto unkontrollierbarere Seitenreaktionen, desto komplexer sind die Nebenprodukte. Daher werden die folgenden drei Punkte zusammengefasst:
Die Mikrowellensynthese kann verwendet werden: Für einige Aminosäuren, die im Syntheseprozess auftreten, die nicht einfach integriert werden können, kann die Mikrowellensynthese verwendet werden. Diese Methode hat bemerkenswerte Ergebnisse und verkürzt die Reaktionszeit erheblich und reduziert die Bildung von zwei wichtigen Nebenprodukten.
Fragmentsynthesemethode kann verwendet werden: Wenn einige Peptide durch gemeinsame Synthesemethoden schwer zu synthetisiert werden können und nicht leicht gereinigt werden, können wir die gesamte Kondensation mehrerer Aminosäuren in einem bestimmten Segment des Peptids zur Peptidkette insgesamt übernehmen. Diese Methode kann auch viele Probleme in der Synthese lösen.
Die Acylhydrazid -Synthese kann verwendet werden: Die Acylhydrazidsynthese von Peptiden ist eine Methode der Festphasensynthese von N-terminales Cys-Peptid und C-terminales Polypeptidhydrazid-chemischer selektiver Reaktion zwischen der Bildung von Amidbindungen zur Erreichung einer Peptidbindungsmethode. Basierend auf der Position von Cys in der Peptidkette unterteilt diese Methode die gesamte Peptidkette in mehrere Sequenzen und synthetisiert sie jeweils. Schließlich wird das Zielpeptid durch Flüssigphasenkondensationsreaktion erhalten. Diese Methode reduziert nicht nur die Synthesezeit eines langen Peptids stark, sondern erhöht auch die Reinheit des Endprodukts signifikant.
Lange Peptidreinigung
Die Besonderheit langer Peptide führt unweigerlich zu komplexen Komponenten von Rohpeptiden. Daher ist es auch eine Herausforderung, lange Peptide durch HPLC zu reinigen. Amyloidreihe des Polypeptidreinigungsprozesses, die viel Erfahrung absorbieren und erfolgreich bei der Reinigung von langem Peptid eingesetzt werden. Durch die Einführung neuer Geräte, das Mischen mehrerer Reinigungssysteme, wiederholte Trennung und andere Erfahrungsmethoden wurde die Erfolgsrate der langen Peptidreinigung erheblich verbessert.
Postzeit: 2025-07-03