In der biologischen Forschung werden üblicherweise Polypeptide mit langer Sequenz verwendet.Bei Peptiden mit mehr als 60 Aminosäuren in der Sequenz werden im Allgemeinen Genexpression und SDS-PAGE verwendet, um sie zu erhalten.Diese Methode dauert jedoch lange und der Trenneffekt des Endprodukts ist nicht gut.
Herausforderungen und Lösungen für die lange Peptidsynthese
Bei der Synthese langer Peptide stehen wir immer vor dem Problem, dass die sterische Hinderung der Kondensationsreaktion mit zunehmender Sequenz in der Synthese zunimmt und die Reaktionszeit angepasst werden muss, um die Reaktion abzuschließen.Je länger die Reaktionszeit ist, desto mehr Nebenwirkungen treten jedoch auf und ein Teil des Zielpeptids wird gebildet.Solche Rückstände – defiziente Peptidketten – sind wichtige Verunreinigungen, die bei der Synthese langer Peptide entstehen.Daher besteht das Hauptproblem, das wir bei der Synthese langer Peptide überwinden müssen, in der Erforschung hochwertiger Reaktionsbedingungen und Reaktionsmethoden, um die Aminosäurekondensationsreaktion umfassender und vollständiger zu gestalten.Verkürzen Sie außerdem die Reaktionszeit, denn je länger die Reaktionszeit, desto mehr unkontrollierbare Nebenreaktionen, desto komplexer die Nebenprodukte.Daher sind die folgenden drei Punkte zusammengefasst:
Mikrowellensynthese kann verwendet werden: Für einige im Syntheseprozess vorkommende Aminosäuren, die nicht einfach zu integrieren sind, kann die Mikrowellensynthese eingesetzt werden.Diese Methode liefert bemerkenswerte Ergebnisse, verkürzt die Reaktionszeit erheblich und reduziert die Bildung von zwei wichtigen Nebenprodukten.
Es kann eine Fragmentsynthesemethode verwendet werden: Wenn einige Peptide mit herkömmlichen Synthesemethoden schwer zu synthetisieren und nicht leicht zu reinigen sind, können wir die gesamte Kondensation mehrerer Aminosäuren in einem bestimmten Segment des Peptids auf die Peptidkette als Ganzes übertragen.Diese Methode kann auch viele Probleme in der Synthese lösen.
Acylhydrazid-Synthese kann verwendet werden: Die Acylhydrazid-Synthese von Peptiden ist eine Methode zur Festphasensynthese von N-terminalem Cys-Peptid und C-terminalem Polypeptid-Hydrazid durch chemische selektive Reaktion zwischen der Bildung von Amidbindungen, um eine Peptidbindungsmethode zu erreichen.Basierend auf der Position von Cys in der Peptidkette unterteilt diese Methode die gesamte Peptidkette in mehrere Sequenzen und synthetisiert diese jeweils.Schließlich wird das Zielpeptid durch eine Flüssigphasenkondensationsreaktion erhalten.Diese Methode verkürzt nicht nur die Synthesezeit langer Peptide erheblich, sondern erhöht auch die Reinheit des Endprodukts erheblich.
Lange Peptidreinigung
Die Besonderheit langer Peptide führt zwangsläufig zu komplexen Bestandteilen der Rohpeptide.Daher ist es auch eine Herausforderung, lange Peptide mittels HPLC zu reinigen.Amyloid-Reihe von Polypeptid-Reinigungsprozessen, die viel Erfahrung absorbieren und erfolgreich bei der Reinigung langer Peptide eingesetzt werden.Durch die Einführung neuer Geräte, das Mischen mehrerer Reinigungssysteme, wiederholte Trennungen und andere Erfahrungsmethoden wurde die Erfolgsrate der Reinigung langer Peptide erheblich verbessert.
Zeitpunkt der Veröffentlichung: 18. April 2023