Die chemische Resistenz von Peptiden hängt von der Zusammensetzung und Sequenz von Aminosäuren ab. Lyophilisierte Peptide sind im Allgemeinen haltbarer als ihre Gegenstücke in Lösung. Mögliche Verschlechterungsmethoden von Peptiden sind wie folgt:
1, Hydrolyse: Dies ist normalerweise in der ASP in der Sequenz (d) für das Problem im Peptid enthalten. Es ist sehr leicht dehydriert, um ein Ring -Imid -Zwischenprodukt zu bilden. Zum Beispiel gibt es ASP in der Sequenz. -Pro (DP) In diesem Fall würde das durch Säurebatalyse produzierte ringförmige Imid-Zwischenprodukt zur Spaltung der Peptidkette führen. In ähnlicher Weise ist ASP-Gly (DG) in der Sequenz vorhanden und in diesem Fall kann das kreisförmige Intermediat in den ursprünglichen ASP-Modus von Isoaspartinsäure (harmlos) oder in ein potenziell inaktives Analogon hydrolysiert werden. Schließlich könnten alle Asparaginsäuremuster vollständig in Isoaspartinsäure -Analoga umgewandelt werden. "Auf einer kleineren Ebene enthält es Serien, eine Sequenz, die auch ein kreisförmiges Imid -Intermediat bildet, das letztendlich die Peptidkette reinigt."
2, Desamidation: Diese basen katalysierte Reaktion tritt häufig in Gegenwart von ASN-Gly (NG) oder Gln-Gly (QG) in der Sequenz auf und folgt einem ähnlichen ASP-Gly (DG) -Sequenzmechanismus. Die Desaminierung (Aminverlust) in der ASN-Gly-Sequenz ergibt ein zyklisches Imid-Zwischenprodukt, das dann hydrolysiert, um Asparaginsäure oder Isoaspartinsäureanaloga zu ergeben. Darüber hinaus kann das Ring-IMid-Intermediat D-ASP oder externe Derotation zu ASND-ISO-ähnlich wie ASP verursachen, die alle inaktiv sein können.
3, Oxidation: CYS und MET -Reste sind die Hauptreste, die reversibler Oxidation unterzogen werden. Die Oxidation von Cystein wird bei höheren pH -Werten beschleunigt, wobei das Thiol die Protonierung leichter beseitigt und dazu neigt, Disulfidbindungen in oder zwischen Ketten zu erzeugen. Die Disulfidbindung kann durch die Behandlung mit Dithiothreit (DTT) oder TRIS (2-carboxylethylphosphin) -Hydrochlorid (TCEP) leicht umgekehrt werden. Methionin wird durch Chemikalie und Photochemie oxidiert, um Methionindioxid zu produzieren, das weiter in Methionindioxid eingeht, die beide schwer umzukehren sind.
4, Diketopiperazin- und Pyroglutaminsäureproduktion: Die Bildung von Dimethylpiperazin tritt normalerweise auf, wenn Gly in der dritten Position des N-Terminus liegt, insbesondere wenn Pro oder Gly in Position 1 oder 2 ist. Diese Reaktion beinhaltet den nucleophilen Angriff der Nitrogen-Stickstoff-Sticker-Sticker-Sticker-Benzylgruppe zwischen der zweiten und dritten Aminosäure, die sich auf der Amid-Zöpp-Gruppe befinden, die sich auf der Amid-Zähl-Gruppe befindet. Diketopiperazin -Methode. Andererseits ist die Bildung von Pyroglutamsäure nahezu unvermeidlich, wenn sich Gln am N-Terminus befindet. Dies ist eine ähnliche Reaktion, bei der der N-terminale Stickstoff den Seitketten-Basiskarbon von Gln angreift, um die Desaminierung eines Pyroglutamylpeptidanalogs zu bilden. Diese Umwandlung tritt auch mit dem N-Terminus auf, der Pyroglutamat-Peptidanaloga enthält.
5. Racemisierung: Dieser Begriff wird häufig verwendet, um den Gesamtverlust der chiralen Integrität einer Aminosäure oder eines Peptids zu beziehen. Die Racemisierung beinhaltet die Umwandlung einer Aminosäure von einem basenkatalysierten Enantiomer, normalerweise L-Form, zu Typ 1 der L-Form-Enantiomere. : 1. Mischung. Dies ist bei der Peptidgenerierung wichtiger, aber im fertigen Peptid weniger problematisch. Darüber hinaus ist der Schalter schwer zu erkennen und kann nicht kontrolliert werden.
Ein allgemeiner Ansatz zur Vermeidung oder Minimierung des Peptidabbaues besteht darin, das Peptid auf-20 ° C oder besser-80 ° C für gefriergetrocknete Lagerung abzubauen, falls verfügbar. Wenn sich das Peptid in einer wässrigen Lösung befindet, sollte jede Aliquot -Probe gefroren werden, um Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Die Exposition gegenüber PH & GT sollte vermieden werden; Medium 8. Wenn jedoch Ph & GT erforderlich ist; Wenn das Peptid bei 8 schmilzt, sollte seine Exposition minimal sein.
Postzeit: 2025-07-01