1. Welche Verunreinigungen gibt es in den nicht-HPLC-gereinigten?
A: modifiziertes Peptid und nicht modifizierte Peptidverunreinigungen im rohen und entsalztierten modifizierten Peptid: wie nicht fullgth modifiziertes Peptid und einige Rohstoffe wie DTT, TFA usw. usw.
2. Welche Verunreinigungen werden durch HPLC gereinigt?
A: Das von HPLC gereinigte modifizierte Peptid hat immer noch viele Verunreinigungen, und die Verunreinigungen sind normalerweise kurze Peptide und ein wenig TFA.
3. Wie lange ist es geeignet?
A: Die Synthese des modifizierten Peptids muss die Länge des modifizierten Peptids, der Ladung, der Hydrophilie und der Hydrophobizität und anderer Faktoren berücksichtigen. Je länger die Gesamtlänge, desto niedriger die Reinheit und Ertrag des Rohprodukts und je höher die Schwierigkeit der Reinigung und die Wahrscheinlichkeit der Syntheseschwierigkeit. Es gibt jedoch keine Möglichkeit, die Sequenz der funktionellen Domäne des modifizierten Peptids zu ändern, aber um die Synthese des modifizierten Peptids zu vervollständigen, können manchmal nur einige Hilfssäuren im stromaufwärtigen und stromabwärts der funktionellen Domäne zugegeben werden, um die Löslichkeit und Hydrophobizität des modifizierten Peptids zu verbessern. Wenn das modifizierte Peptid zu kurz ist, kann es Probleme in der Synthese geben. Das erste Problem ist, dass das synthetisierte modifizierte Peptid bestimmte Schwierigkeiten im Nachbearbeitungsprozess aufweist. Das modifizierte Peptid innerhalb von 5 Peptiden hat normalerweise hydrophobe Aminosäuren, sonst ist die Nachbearbeitung schwierig. Modifizierte Peptide unter 15 Aminosäureresten können im Allgemeinen mit zufriedenstellender Ausbeute und Ausbeute erhalten werden.
Einige Fragen und Antworten zur Löslichkeit modifizierter Peptide
4.. Wie beurteilen Sie die Löslichkeit des modifizierten Peptids aus der Sequenz?
(1) Das modifizierte Peptid, das einen hohen Anteil an hydrophoben Aminosäuren wie Leu, Val, Iie, MET, PHE und TRP enthält, ist in wässriger Lösung nicht leicht zu löslich oder fast unlöslich. Diese Aminosäure kann entweder in der Reinigung oder in der Synthese problematisch sein.
(2) the proportion of hydrophobic amino acids under normal conditions < The proportion of charged amino acids can reach up to 20%. If the N or C of the modified peptide is short, the increase of polar amino acids can also improve the solubility.
5. Warum ist es schwierig, Cys, MET oder TRP zu synthetisieren?
A: Modifizierte Peptide, die Cys, MET oder TRP enthalten, können nicht synthetisiert werden, und hohe Reinheitsprodukte sind schwer zu erhalten. Dies ist hauptsächlich darauf zurückzuführen, dass diese Gruppen weniger stabil und anfällig für Oxidation sind. Die Verwendung und Speicherung dieser modifizierten Peptide erfordert eine besondere Sorgfalt, um eine wiederholte Öffnung des Deckels zu verhindern.
6, warum wird eine synthetische Ausbeute oder Reinheit sehr niedrig sein?
A: Es gibt einen beträchtlichen Unterschied zwischen der Synthese modifizierter Peptide und der Synthese von Primern. Es gibt nur sehr wenige Primer, die nicht synthetisiert werden können, aber es gibt oft modifizierte Peptide, die nicht synthetisiert werden können. Wie Val, Ile, Tyr und Trp, Leu, Phe, Gln und Thr Aminosäure in der Nähe oder Schleife können modifizierte Peptide nicht im Syntheseprozess gelöst werden, die synthetische Effizienz ist niedriger. Die Effizienz der Synthese und die Reinheit des Produkts sind in den folgenden Fällen sehr niedrig, wie z.
7. Wie wird es gereinigt?
A: Modifizierte Peptide werden im Allgemeinen durch Umkehrphasensäule (wie C8, C18 usw.) bei 214 nm gereinigt. Das Puffersystem ist im Allgemeinen eine Lösung, die TFA enthält, Ph2.0. Buffera enthielt 0,1%Tfainddh2O und BufferB enthielt 1%TFA/ACN/PH2.0. Es wurde vor der Reinigung in Buffera gelöst; Wenn die Lösung nicht zufriedenstellend ist, lösen Sie sich mit BufferB auf und verdünnen Sie sie mit Buffer; Bei hoch hydrophoben modifizierten Peptiden wird manchmal etwas Formikat oder Essigsäure zugegeben.
Postzeit: 2025-07-01