Nach der chemischen Synthese von Peptiden durch Festphasen-FMOC gibt es viele Spaltmethoden, und zwei Grundtypen werden nun eingeführt, die wir üblicherweise anwenden.
1. Starkes Säureverfahren (TFA)
Das trockene Harz wurde in einen Schüttelkolben gelegt und es wurde eine angemessene Menge an Aasfrägern hinzugefügt. (Aasfresser) Trifluoressigsäure-Säure-Schnittreagenz (TFA), 10-25 ml/g Harz, gekappt und zeitweise bei Raumtemperatur mit Drehung geschüttelt. Das Harz wurde abgelassen, 2-3 Mal mit neuem TFA gewaschen, das Filtrat wurde kombiniert und das 8-10-fache des Eisdiethylethers wurde fallen. Manchmal kann etwas TFA gedämpft werden, um Rohpeptidniederschläge zu erhalten. Ether kann verwendet werden, um die Ausfällungseffizienz durch eisassistentes Abkühlen zu erhöhen. Schließlich wurde das ausgefällte Rohpeptidprodukt gesammelt.
Geeignetes Harz: Wang Harz oder Eisbahn Amidharz
2, schwache Säuremethode (TFA oder Essigsäureverdünnung) 1% TFA:
1 g harzhaltiges Peptide wurde zu einem Glasschütteltkolben aus Dichlormethan -Lösung gegeben, der 1%TFA enthielt, versiegelt und 2 Minuten lang geschüttelt. Das Filtrat wurde mit Stickstoff in einen weiteren neuen Methanol -Shake -Kolben, der 10% Pyridin enthielt, gedrückt, und das Verfahren wurde 10 Mal wiederholt. Die am Harz verbleibenden Schutzpeptide wurden dreimal unter Verwendung von 30 ml DCM und 30 ml MeOH gewaschen. Die Rückstände wurden von TLC oder HPLC überprüft und gereinigt. Alle Filtrate wurden kombiniert und 5% des Lösungsmittels unter reduziertem Druck gekocht. Vierzig ml Wasser wurden zugegeben und die Ausfällung half bei der Kühlmischung. Nach der Filtration wurde das Produkt dreimal mit sauberem Wasser gewaschen, in einen Vakuumtrocknungsofen gelegt und mit KOH oder P2O5 getrocknet.
Verdünne Essigsäure:
Die am Harz hängenden Peptide wurden 2 h unter Verwendung von ACOH // TFE/DCM (2: 2: 6) mit Schneidlösung behandelt, das Harz wurde filtriert und das Harz wurde dreimal mit Schneidlösung gewaschen. Die überschüssige Essigsäure wurde durch Zugabe von 15-fachem N-Hexan zum gemischten Filtrat und dem Drehdrücker entfernt.
Anwendungsharz: 2-CTC-Harz
Postzeit: 2025-07-01